![\"pesquisa-20121124145045-300x200\"](\"http:\/\/antonini.med.br\/home\/wp-content\/uploads\/2013\/09\/pesquisa-20121124145045-300x200.jpg\")
Com aplica\u00e7\u00e3o de c\u00e9lulas-tronco indiferenciadas retiradas do broto hep\u00e1tico, pesquisadores da USP reduzem para menos da metade o tempo de regenera\u00e7\u00e3o do f\u00edgado de ratos submetidos a cirurgia que removeu 70% do \u00f3rg\u00e3o<\/p>\n
Uma terapia celular desenvolvida por pesquisadores da Universidade de S\u00e3o Paulo (USP) reduziu para menos da metade o tempo de regenera\u00e7\u00e3o do f\u00edgado de ratos submetidos a uma cirurgia que removeu 70% do \u00f3rg\u00e3o.<\/p>\n
O objetivo imediato \u00e9 testar a efic\u00e1cia do m\u00e9todo no tratamento de cirrose hep\u00e1tica induzida em animais. Futuramente, os cientistas pretendem avaliar a possibilidade de adaptar o tratamento para humanos.<\/p>\n
As c\u00e9lulas-tronco usadas no estudo foram obtidas do broto hep\u00e1tico de embri\u00f5es de ratos com 12 dias e meio de gesta\u00e7\u00e3o, explicou Maria Ang\u00e9lica Miglino, professora da Faculdade de Medicina Veterin\u00e1ria e Zootecnia (FMVZ) da USP e coordenadora da pesquisa financiada pela FAPESP .<\/p>\n
\u201cNos mam\u00edferos, logo no in\u00edcio da gesta\u00e7\u00e3o surge uma estrutura conhecida como intestino primitivo, a partir da qual se formam os brotos que dar\u00e3o origem a todos os \u00f3rg\u00e3os da cavidade abdominal, como o f\u00edgado, o p\u00e2ncreas, a bexiga e as al\u00e7as intestinais\u201d, disse Miglino.<\/p>\n
As c\u00e9lulas-tronco do broto hep\u00e1tico t\u00eam tend\u00eancia natural para se transformar em hepat\u00f3citos e, por conta disso, seriam teoricamente mais seguras e eficientes para uso no tratamento regenerativo do f\u00edgado quando comparadas a qualquer outro tipo de c\u00e9lula-tronco.<\/p>\n
\u201cEssas c\u00e9lulas t\u00eam potencial para formar um f\u00edgado. Nossos objetivos eram descobrir quando elas s\u00e3o formadas, qual seria o melhor momento para retir\u00e1-las do embri\u00e3o, cultiv\u00e1-las in vitro e us\u00e1-las para tratar cirrose induzida em ratos\u201d, contou Miglino.<\/p>\n
Durante o mestrado de Amanda Olivotti, realizado na FMVZ com orienta\u00e7\u00e3o da professora Rose Eli Grassi Rici, os pesquisadores identificaram o momento ideal da gesta\u00e7\u00e3o para obten\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas-tronco, realizaram o cultivo, a caracteriza\u00e7\u00e3o morfol\u00f3gica e as an\u00e1lises histol\u00f3gicas.<\/p>\n
\u201cAs c\u00e9lulas mostraram grande capacidade proliferativa, mantendo-se pluripotentes principalmente na metade do 12\u00ba dia ap\u00f3s a fecunda\u00e7\u00e3o. N\u00e3o apresentaram marcadores de transforma\u00e7\u00e3o neopl\u00e1sica ou de erros gen\u00e9ticos\u201d, contou Olivotti.<\/p>\n
O passo seguinte, realizado j\u00e1 no doutorado de Olivotti, foi induzir o quadro de insufici\u00eancia hep\u00e1tica nos animais para testar o poder regenerativo da terapia.<\/p>\n
\u201cNo primeiro grupo de roedores foi retirado 70% do f\u00edgado. Isso causa d\u00e9ficit metab\u00f3lico e leva a uma insufici\u00eancia equivalente a dos casos de perda do \u00f3rg\u00e3o por trauma. Tamb\u00e9m simula a condi\u00e7\u00e3o de crian\u00e7as que nascem com o f\u00edgado atrofiado\u201d, disse Durvanei Augusto Maria, pesquisador do Laborat\u00f3rio de Bioqu\u00edmica e Biof\u00edsica do Instituto Butantan e coorientador do trabalho.<\/p>\n
Em um segundo modelo animal, a cirrose foi induzida pela administra\u00e7\u00e3o de medicamentos que causam fibrose nas c\u00e9lulas do f\u00edgado, levando a um quadro semelhante ao provocado pelo consumo excessivo de \u00e1lcool ou pela inflama\u00e7\u00e3o cr\u00f4nica resultante de doen\u00e7as como hepatite.<\/p>\n
Vias de administra\u00e7\u00e3o
\nOs pesquisadores testaram quatro diferentes vias de administra\u00e7\u00e3o da terapia nos ratos hepatectomizados. As c\u00e9lulas-tronco foram marcadas com uma subst\u00e2ncia fluorescente para que seu deslocamento pelo corpo pudesse ser monitorado por meio de exames de ultrassom, raios X e tomografia de emiss\u00e3o de p\u00f3sitrons (PET).<\/p>\n
A primeira via avaliada foi a endovenosa, na qual as c\u00e9lulas eram introduzidas no organismo dos ratos por meio da veia peniana. Em um segundo grupo de roedores, as c\u00e9lulas foram injetadas no perit\u00f4nio, membrana que reveste os \u00f3rg\u00e3os da cavidade abdominal.<\/p>\n
A terceira via testada foi a endotraqueal, que consistia em passar uma sonda no interior da traqueia e levar as c\u00e9lulas at\u00e9 o pulm\u00e3o. \u201cAlguns pacientes com cirrose desenvolvem s\u00edndrome respirat\u00f3ria e essa seria uma via alternativa para promover primeiro melhora no pulm\u00e3o e, em segunda inst\u00e2ncia, no f\u00edgado\u201d, explicou Augusto Maria.<\/p>\n
Por \u00faltimo foi avaliada a via oroenteral, na qual uma sonda era introduzida pela cavidade oral, passava pela faringe, es\u00f4fago, est\u00f4mago e aplicava as c\u00e9lulas-tronco no duodeno. Por essa via, segundo Olivotti, as c\u00e9lulas chegaram em maior n\u00famero ao f\u00edgado e se mantiveram constantes no \u00f3rg\u00e3o por mais tempo.<\/p>\n
\u201cObtivemos os melhores resultados pela via oroenteral por causa do ducto hep\u00e1tico, canal que une o duodeno e o f\u00edgado e serve normalmente para a passagem da bile. Essa via, at\u00e9 hoje, ningu\u00e9m havia testado\u201d, disse Miglino.<\/p>\n
Segundo Augusto Maria, a inten\u00e7\u00e3o \u00e9 avaliar uma quinta via de administra\u00e7\u00e3o, mais direta, por\u00e9m de maior risco: a art\u00e9ria hep\u00e1tica. \u201cDo ponto de vista cir\u00fargico, \u00e9 mais f\u00e1cil passar uma sonda do que mexer com uma art\u00e9ria. Mas pretendemos avaliar tamb\u00e9m essa via, pois a ideia \u00e9 desenvolver um modelo de tratamento que tenha reprodutibilidade em humanos\u201d, disse.<\/p>\n
Os animais foram acompanhados por 21 dias. Ap\u00f3s esse per\u00edodo, as c\u00e9lulas-tronco se mostraram vi\u00e1veis em todas as vias de administra\u00e7\u00e3o, com maior ou menor efic\u00e1cia em termos de regenera\u00e7\u00e3o do f\u00edgado.<\/p>\n
\u201cUm f\u00edgado leva em m\u00e9dia 25 dias em modelos experimentais para se regenerar ap\u00f3s a hepatectomia. Com a aplica\u00e7\u00e3o de uma \u00fanica dose de c\u00e9lulas-tronco indiferenciadas do broto hep\u00e1tico nos animais submetidos \u00e0 hepatectomia, a m\u00e9dia foi reduzida para dez dias, mostrando ser um sistema altamente eficaz\u201d, disse Olivotti.<\/p>\n
Embora o f\u00edgado dos animais tenha voltado ao volume original, sua funcionalidade ainda n\u00e3o foi avaliada pelos pesquisadores. \u201cEssas an\u00e1lises ser\u00e3o feitas at\u00e9 o fim do doutorado, mas os resultados in vitro indicam que o \u00f3rg\u00e3o manteve sua capacidade de metaboliza\u00e7\u00e3o\u201d, disse Olivotti.<\/p>\n
O modelo piloto de cirrose induzida por medicamentos precisou ser revisto, uma vez que a droga usada na primeira tentativa \u2013 a dimetilnitrosamina (DMN) \u2013 mostrou-se agressiva demais e poucos animais sobreviveram ao experimento.<\/p>\n
\u201cIniciamos um novo protocolo de indu\u00e7\u00e3o com tiocetamida (TAA), que \u00e9 menos agressiva, mas o processo de desenvolvimento de cirrose leva mais tempo para acontecer\u201d, disse Olivotti.<\/p>\n
No momento, os pesquisadores tamb\u00e9m fazem um novo modelo de indu\u00e7\u00e3o por hepatectomia no qual 90% do f\u00edgado \u00e9 removido cirurgicamente. \u201cEste protocolo tem de ser mais invasivo para podermos monitorar por mais tempo o processo de regenera\u00e7\u00e3o do f\u00edgado\u201d, explicou.<\/p>\n
Aplica\u00e7\u00e3o cl\u00ednica
\nEmbora a estrat\u00e9gia tenha se mostrado promissora, ainda h\u00e1 muitos obst\u00e1culos a serem vencidos at\u00e9 que a terapia possa ser testada em humanos. O primeiro deles \u00e9 descobrir uma forma vi\u00e1vel para obter as c\u00e9lulas do broto hep\u00e1tico.<\/p>\n
\u201cAinda que a lei permitisse, n\u00e3o podemos usar embri\u00f5es remanescentes de tratamentos de reprodu\u00e7\u00e3o assistida, pois nessa fase de desenvolvimento o intestino primitivo ainda n\u00e3o est\u00e1 formado\u201d, disse Miglino.<\/p>\n
Embora seja tecnicamente poss\u00edvel usar c\u00e9lulas de fetos que sofreram aborto espont\u00e2neo ou provocado, haveria muitas quest\u00f5es \u00e9ticas e legais envolvidas.<\/p>\n
\u201cUma possibilidade seria formar um banco de c\u00e9lulas de primatas adaptadas a formar f\u00edgado humano. Mas precisamos investigar ainda se o transplante entre esp\u00e9cies diferentes seria vi\u00e1vel\u201d, disse Miglino.<\/p>\n
Para Augusto Maria, ainda ser\u00e3o necess\u00e1rios estudos de longa dura\u00e7\u00e3o com animais para que todos os riscos dessa terapia sejam avaliados. \u201c\u00c9 poss\u00edvel que a aplica\u00e7\u00e3o das c\u00e9lulas induza a forma\u00e7\u00e3o de trombos e crie \u00e1reas infartadas. Pode ainda formar um tumor ou induzir doen\u00e7as autoimunes\u201d, ponderou.<\/p>\n
Os estudos de longa dura\u00e7\u00e3o, acrescentou, tamb\u00e9m s\u00e3o necess\u00e1rios para entender se as c\u00e9lulas-tronco estimulam o tecido agredido a se regenerar ou se s\u00e3o elas pr\u00f3prias que se proliferam dentro do \u00f3rg\u00e3o.<\/p>\n
\u201cUma poss\u00edvel estrat\u00e9gia seria induzir cirrose em porcos para avaliar os efeitos da terapia celular. O f\u00edgado su\u00edno \u00e9 o que mais se assemelha ao humano\u201d, disse Augusto Maria.<\/p>\n
Os resultados preliminares est\u00e3o agora sendo enviados para publica\u00e7\u00e3o. A pesquisa est\u00e1 vinculada ao Projeto Tem\u00e1tico”O enigma vitelino”, tamb\u00e9m coordenado por Miglino.<\/p>\n
Leia o texto original aqui<\/a><\/p>\n